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關(guān)于液相C18柱的詳細使用方法盡在本篇

  • 發(fā)表時間2023-12-11
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  液相C18柱使用方法的關(guān)鍵在于對樣品分離和純化的理解以及對溶劑與梯度的靈活調(diào)整。通過熟練的操作和精確的控制,可以獲得高效、高分離度的樣品純化。此外,在柱的保養(yǎng)和維護方面也需十分重視,以延長柱的使用壽命并確保測量結(jié)果的準確性。
 
  液相C18柱是一種常用的反相柱,在分離和純化有機化合物時起著重要作用。以下是液相C18柱的使用方法的詳細步驟:
 
  一、準備工作:
 
  1.檢查柱的狀態(tài),確保檢測床不破裂或損壞。
 
  2.將柱底和柱頂連接好,并確保連接口密封良好。
 
  3.檢查并配置用于柱操作的溶劑。常用的溶劑包括乙腈、甲醇和水。
 
  二、柱的裝載和平衡:
 
  1.使用合適體積的溶劑使得柱填充物濕潤。
 
  2.把待分離樣品按照所需濃度稀釋,并通過濾膜或其他方法過濾掉雜質(zhì)。
 
  三、將樣品注入柱上。
 
  使用純?nèi)軇┻M行柱的平衡,直到樣品溶劑通過柱時不含有待測物。
 
  四、樣品的注入:
 
  1.選擇合適的進樣方式,如手動注射器或自動進樣器等。
 
  2.根據(jù)所需的分離效果和分離速度,確定進樣量。
 
  五、溶劑梯度流動:
 
  1.確定合適的溶劑梯度流動方案。一般來說,起始時使用弱極性溶劑,然后逐漸增加強極性溶劑的比例。
 
  2.控制溶劑流動速度以及梯度變化的速度。
 
  六、離心洗脫:
 
  1.當樣品組分出現(xiàn)在柱床上時,可以通過調(diào)整溶劑梯度或運行時間來優(yōu)化分離效果。
 
  2.根據(jù)分離和純化目的,確定適當?shù)南疵摱螘r間。
 
  3.通過監(jiān)測樣品的吸光度、色譜峰的強度或質(zhì)譜圖,確定最佳洗脫時間。
 
  七、柱的保存和維護:
 
  1.在使用完畢后,用純?nèi)軇┻M行柱洗滌,以去除殘留的樣品和溶劑。
 
  2.從柱底逆流通入體積約為1-2倍柱的溶劑,并保持一段時間讓柱充分濕潤。
 
  3.在儲存之前,使用合適的保護劑封存柱,避免填充物的污染。
 
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